大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒說明書

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大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Epithelial Cells】
     大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒說明書大鼠角膜是唯的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能。分三層細胞層，外層即是上皮細胞。其中，角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發出信號從而激活角膜防御系統。角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶，防止UV-和4-羥基壬烯醛對細胞造成傷害。大鼠角膜上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的角膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的角膜組織能使得角膜組織中上皮細胞的一些功能特性發生改變，從而將上皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養大鼠角膜上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒適合于培養大鼠的角膜上皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM組大鼠角膜上皮細胞織解離液（3×ml） （2）大鼠角膜上皮細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠角膜上皮細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）大鼠角膜上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠角膜上皮細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠角膜上皮細胞基礎培養基（5 x 00ml） （7）大鼠角膜上皮組織預備液（ x 00 ml） （8）大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟：
大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

PCNA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  IP   ICC/IF    50 µg

erpinF2 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Coagulation Factor VIII / FVIII / F8 抗體 (Heavy Chain), 兔單抗 ELISA    50 µg

CRELD 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

STMN / Stathmin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Pancreasin / Marapsin / PRSS27 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD59 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test

ITGA6 & ITGB Heterodimer 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

LDLR / LDL Receptor 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD48 / SLAMF2 / BCM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒說明書哈巴苷英文名稱：Harpagide分子式：364.35分子量：C5H24O0：835927

2,3,9,0,6,7,23,24-八氟酞菁銅(II)(升華純)分子式：720.0英文名稱：2,3,9,0,6,7,23,24 -八氟酞菁銅（II）（升華純）：4865-60-9分子量： C32H8CuF8N8

3-(三氟甲)*氫氧銨英文名稱：3- (three f) phenyl three methyl hydroxide分子式：22.22分子量： C0H4F3NO：68254-4-

2-羥甲-3,4-二甲氧吡分子式：69.8英文名稱：2-, -3,4- two：72830-08-分子量： C8HNO3

2-氯-3-乙酰吡分子式：55.58英文名稱：2- -3- acetyl pyridine：55676-2-6分子量： C7H6ClNO

硝酸鋁九水合物分子式：375.3英文名稱：Aluminum nitrate nine hydrate：7784-27-2分子量： Al(NO3)3•9H2

吉拉爾特試劑T英文名稱：Giralt reagent T分子式：67.64分子量： C5H4ClN3O：23-46-6

PMBP(萃取劑Ⅱ)英文名稱：PMBP (extraction agent II)分子式：分子量：：

聚對二氯甲分子式：277.9英文名稱：Poly two chlorine toluene：28804-46-8分子量： C6H4Cl2

八氟萘分子式：248.075英文名稱：Eight f：33-72-4分子量： C8F8

注意事項：
. 接收到大鼠角膜上皮細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。